近年來, 肺癌的發病率和死亡率在世界範圍內呈不斷上升的趨勢,其中80%~85%表現為非小細胞肺癌 ( NSCLC )。

20(S)- 原人參二醇 ( PPD )是從西洋參(Panax quinquefolium L.)莖葉總皂苷中分離、轉化而得到的皂苷元,對非小細胞肺癌 A549細胞具有很強的抑製作用,但其誘導A549細胞發生凋亡以及抑制PI3K/AKT信號轉導通路的作用尚不明確。

本研究採用熒光染色法、瓊脂糖凝膠法、流式細胞法等,檢測了PPD誘導A549細胞凋亡情況;應用Western Blot、QPCR等方法,檢測凋亡過程中相關蛋白和基因表達情況,探討PPD對PI3K/AKT信號轉導途徑的抑制以及在MAPK信號轉導途徑中的作用;應用體外瞬時轉染激活型AKT技術,提高AKT在A549細胞中的表達,體外觀察PPD對細胞凋亡的影響。

研究結果表明, PPD可抑制A549細胞生長及誘導其發生凋亡 ,呈劑量和時間依賴性; PPD通過下調Bcl-2/ Bax蛋白及基因的表達,降低線粒體膜電位,促使Cyt c、AIF、Smac等凋亡相關因子從線粒體向胞漿釋放,啟動Caspase家族的順序激活,其誘導的細胞凋亡是線粒體依賴性的,機制可能與活性氧的產生有關。

此外, PPD可降低AKT的磷酸化,抑制AKT上游PDK及其下游c-Raf等蛋白的磷酸化,減弱AKT對GSK-3β的抑製作用; PPD與PI3K抑製劑聯合應用後,A549細胞凋亡率明顯增加; PPD可促進轉染pECE-Myr-HA-AKT A549細胞凋亡 ,說明PPD誘導A549細胞凋亡主要是通過抑制PI3K/AKT信號轉導途徑發揮作用的。p44/42 MAPK及JNK MAPK信號通路亦可能參與了PPD誘導A549細胞凋亡的過程。

綜上, PPD誘導A549細胞凋亡及抑制PI3K/AKT信號轉導通路的研究,不僅為傳統中藥抗腫瘤作用機制提供了新思路,而且還為肺癌的治療提供新的靶點,具有重要的社會和經濟價值。

摘自吉林大學2009年博士論文《20（S）— 原人參二醇誘導非小細胞肺癌 A549細胞凋亡及抑制P13K/AKT信號途徑的研究》張銳博士